DNA合成儀的基本組成結(jié)構和性能

　　

　　試劑驅(qū)動系統(tǒng)

　　

　　一般地，DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體（氬氣）或氮氣及電磁閥組驅(qū)動液體試劑，也可采用氦氣驅(qū)動試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統(tǒng)及精密蠕動泵，可不采用氣體為驅(qū)動系統(tǒng)。采用氣體及電磁閥驅(qū)動液體試劑時，需首先將管路系統(tǒng)電磁閥前段，含試劑瓶組中壓力加壓到規(guī)定氣壓，通過合成管理軟件或手動打開電磁閥（一般打開時間為數(shù)ms），即可驅(qū)動液體試劑到所需的合成柱中。

　　

　　試劑和堿基瓶組

　　

　　DNA合成儀一般需堿基瓶組及試劑瓶組。試劑瓶組一般zui少為6個，含脫保護劑（Deb）、活化劑（act）、蓋帽試劑A（capA)、蓋帽試劑B(capB)、氧化劑（OXI）及洗脫乙腈（ACN），每種儀器一般都多設置1-2個試劑瓶位，用于特殊產(chǎn)物的合成。堿基瓶組一般zui少為4個標準堿基（A/C/G/T）,同時搭配2-多個特殊堿基瓶位，用于熒光標記等合成。

　　

　　壓力管路及輸送管路

　　

　　DNA 合成儀的一般原則需要保持內(nèi)外氣體隔絕，因此無論試劑瓶、堿基瓶均需密封保持一定壓力。所有壓力管路目前均采用特氟龍導管，直徑為1/16—1/8吋。

　　

　　每個瓶子都有一個氬氣壓力管道及輸送管道進入瓶蓋插塞，對于亞磷酰胺，1—8號瓶其壓力管道也作為排氣管。氬氣管要保持在液體水平以上，而輸送管卻伸到瓶的底部。當閥門正確設置打開時，儲液瓶上部空間由氬氣加壓，液體被推進輸送管，流到其目的地。

　　

　　亞磷酰胺瓶排氣

　　

　　除了加壓外，亞磷酰胺瓶都是用壓力排氣管排氣的。把亞磷酰胺放人儀器前，要用氬氣排除空氣使其凈化。凈化是通過輸送管輸送氣體，當氣體輸送到瓶內(nèi)時，空氣經(jīng)壓力排氣管排出。這是由瓶子更換步驟自動完成的。廢液瓶是輸送系統(tǒng)的低壓側(cè)，必須將出口與大氣相通。要確保排氣管通到通風柜。如果排氣管阻塞，將會產(chǎn)生反壓，試劑和溶劑的輸送會受到抑制。

　　

　　輸送電磁閥

　　

　　試劑輸送系統(tǒng)包括兩個試劑閥塊(8堿基儀器有3個)及2個或4個柱閥塊。閥塊控制氣體和化學試劑流人柱子及出口。除亞磷酰胺和四唑以外，試劑和溶劑都被同時輸送到所有活化柱。當有多個活化柱時，對流速的細微變化，以自動調(diào)節(jié)每個柱子的輸送次數(shù)來補償。每一個5—端口柱閥塊將流出物導人廢液口、DMT收集口，或DNA收集瓶，它也控制用于除去或沖洗柱內(nèi)和柱閥塊內(nèi)的試劑的氬氣。

　　

　　輔助真空

　　

　　對于閥塊的適當運行，關鍵是隔膜形成一個圓頂小空隙，每次電磁閥打開時，抽氣泵為每個閥塊提供了輔助真空，輔助真空在隔膜的螺線管一側(cè)形成，使隔膜形成一圓頂空隙。

　　

　　合成柱

　　

　　起始結(jié)合在載體（一般為CPG）上的核苷酸是裝在一次性的柱子中，除柱體外，還有2個固定過濾板和2個接頭，所有的部件都由惰性材料制成。固定過濾板是多孑L性聚苯乙烯固定在兩端蓋子中。人口和出口都是母路厄氏(1uer)接頭，與儀器的公路厄氏接頭配對。柱子是對稱的(沒有頂端和底部、前后之分)，可以以任何方式與公路厄氏接頭相連接。每一個柱子都用顏色編號，表示不同的起始核苷酸，以及有一個*的連續(xù)順序號碼。正常的流路是從底部進入，通過向上輸送液體，使CPG顆粒上升并保持懸浮狀態(tài)。溶劑和試劑的流速已經(jīng)設置好，能使顆粒適當?shù)鼗旌稀?/div>